आलू में मार्कर की मदद से किस्म चुनना: CPRI ने डीएनए जाँच से 1,489 आलू कैसे परखे
मार्कर-असिस्टेड सिलेक्शन क्या है, और ICAR-CPRI ने 10 KASP डीएनए मार्करों से आलू की 1,489 लाइनों में झुलसा, वायरस Y और सिस्ट नेमाटोड के जीन कैसे खोजे।

मार्कर की मदद से चुनाव का मतलब है आलू को किसी काम के जीन की डीएनए जाँच से चुनना, खेत में वह गुण दिखने का इंतज़ार किए बिना। ICAR-केंद्रीय आलू अनुसंधान संस्थान ने अपने आलू संग्रह को रोग झेलने के पाँच निशानों के लिए एक साथ जाँचा। यह निकला:
- R2झुलसा झेलने वाला जीन1,476 में से 10 लाइनें
- R8झुलसा झेलने वाला जीन, दो मार्कर2 और 13 लाइनें
- Rystoआलू का वायरस Y झेलने वाला, तीन मार्कर25 से 35 लाइनें
- Ryadgआलू का वायरस Y झेलने वाला, दो मार्कर1 और 2 लाइनें
- सिस्ट नेमाटोडदो नए मार्कर ठीक चले, पर झेलने वाले और न झेलने वाले आलू में फ़र्क़ नहीं कर पाएअभी काम का नहीं
यही गिनी-चुनी लाइनें काम की हैं: झुलसा और वायरस झेलने वाली अगली किस्मों की माँ-बाप यही बनेंगी।
मार्कर-असिस्टेड सिलेक्शन क्या है?
हर आलू में हज़ारों जीन होते हैं, और उनमें से कुछ तय करते हैं कि पौधा किसी रोग से लड़ पाएगा या नहीं। डीएनए मार्कर डीएनए का एक छोटा, जाना-पहचाना टुकड़ा है जो ऐसे जीन के ठीक ऊपर या बगल में बैठा होता है। मार्कर है, तो जीन भी लगभग पक्का है। मार्कर की मदद से चुनाव (मार्कर-असिस्टेड सिलेक्शन) का मतलब बस इतना है कि इस मार्कर को जाँच की तरह इस्तेमाल करें: ब्रीडर पत्ती का छोटा नमूना लेता है, जाँच करता है और सिर्फ़ उन पौधों को रखता है जिनमें जीन का सही रूप है।
इसे ब्लड ग्रुप की जाँच की तरह समझिए। किसी का ब्लड ग्रुप जानने के लिए किसी इमरजेंसी का इंतज़ार नहीं करना पड़ता; एक जाँच बता देती है। ठीक वैसे ही, ब्रीडर को यह जानने के लिए झुलसा फैलने का इंतज़ार नहीं करना पड़ता कि किन पौधों में झुलसा झेलने वाला जीन है।
इस जाँच के मार्कर KASP मार्कर कहलाते हैं, यानी कॉम्पिटिटिव एलील स्पेसिफ़िक PCR। हर मार्कर डीएनए का वह एक अक्षर पढ़ता है जहाँ रोग झेलने वाले और न झेलने वाले आलू अलग होते हैं। इनमें जेल नहीं लगता, इसलिए लैब एक प्लेट पर सैकड़ों नमूने जाँच सकती है और मशीन जवाब पढ़ती है।
खेत की जाँच या डीएनए की जाँच: मार्कर से ब्रीडर का समय क्यों बचता है
रोग आने का इंतज़ार
- झुलसा: खेत में लगाओ, रोग आने का इंतज़ार करो, और हर हफ़्ते पौधों को नंबर दो, जब तक जाँच के लिए लगी कमज़ोर किस्म पूरी झुलस न जाए।
- सिस्ट नेमाटोड: हर लाइन को ग्लासहाउस में नेमाटोड वाली मिट्टी में उगाओ और बुवाई के 55 से 65 दिन बाद जड़ें देखो।
- एक सीज़न, एक जगह, एक जवाब। सूखा साल हो तो झुलसा भी नहीं, नतीजा भी नहीं।
सीधे जीन पढ़ो
- छोटे पौधे की पत्ती का छोटा टुकड़ा काफ़ी है। न रोग का इंतज़ार, न सीज़न का।
- सैकड़ों लाइनें एक प्लेट पर जाती हैं, और मशीन हर खाना पढ़ती है।
- उन्हीं पौधों पर कई जीन एक साथ जाँचे जा सकते हैं, ताकि ब्रीडर कई रोगों की ताक़त एक किस्म में जोड़ सके।
मार्कर खेत के ट्रायल की जगह नहीं लेते। नई किस्म को रिलीज़ से पहले खेत में अपने को साबित करना ही होता है। मार्कर बस इतना करते हैं कि हज़ारों पौधों की छँटाई शुरू में ही कर देते हैं, ताकि खेत की जगह और सालों की जाँच सिर्फ़ होनहार पौधों पर लगे। जब किस्म झुलसा नहीं झेल पाती तो क्या होता है, यह हमारी झुलसा गाइड (अंग्रेज़ी) में पढ़ें।
KASP डीएनए जाँच कैसे होती है, क़दम दर क़दम
पत्ती का टुकड़ा लो
हर पौधे की पत्ती से एक छोटी गोल टिकिया काटी जाती है और उस पर पौधे का नंबर लिखा जाता है।
डीएनए निकालो
डीएनए निकालकर जाँच वाली प्लेट के छोटे खानों (वेल) में डाला जाता है, हर खाने में एक पौधा, और कुछ खाने कंट्रोल के लिए ख़ाली छोड़े जाते हैं।
चमकने वाला मिश्रण डालो
जाँच के मिश्रण में दो रंग की डाई होती हैं, एक डीएनए अक्षर के रोग झेलने वाले रूप के लिए और एक न झेलने वाले रूप के लिए। मशीन डीएनए की कॉपी बनाती है और मेल खाने वाली डाई चमक उठती है।
रंग पढ़ो
मशीन हर खाने को उसके दोनों रंगों के हिसाब से ग्राफ़ पर बिठाती है। पौधे साफ़ गुटों में बँट जाते हैं: रोग झेलने वाले, न झेलने वाले, या दोनों रूपों वाले।
- रोग झेलने वाले: वे गिने-चुने खाने जो सिर्फ़ रोग झेलने वाले रंग में चमकते हैं।
- मिले-जुले: वे पौधे जिनमें दोनों रूप हैं।
- न झेलने वाले: संग्रह के ज़्यादातर पौधे।
- ख़ाली कंट्रोल: बिना डीएनए वाले खाने, यह दिखाने के लिए कि जाँच साफ़ है।
यह चित्र बात समझाने के लिए है; यह जाँच का असली डेटा नहीं है।
CPRI की डीएनए जाँच में 1,489 आलुओं में क्या मिला
संस्थान ने अपने जर्मप्लाज़्म संग्रह की, यानी आलुओं का वह भंडार जिससे ब्रीडर माँ-बाप चुनते हैं, आलू की 1,489 लाइनें 10 KASP मार्करों से जाँचीं। इनमें से छह मार्कर इंटरनेशनल पोटैटो सेंटर (CIP) पहले ही परख चुका था; चार नए थे, जो छपी हुई रिसर्च से चुने गए।
- 15,260प्लेटों पर जाँचे गए खाने
- 14,786खानों का जवाब साफ़ मिला
- 99%कॉल रेट: जितने खाने पढ़े जा सके
- 320ख़ाली कंट्रोल खाने, जाँच परखने के लिए
सिर्फ़ 154 खानों का जवाब साफ़ नहीं आया। इतने बड़े पैमाने की जाँच के लिए यह साफ़ नतीजा है, और इससे दिखता है कि बिना जेल वाले मार्कर बड़े संग्रह के लिए क्यों ठीक हैं: इतने नमूनों के जेल आँख से पढ़ना धीमा, थकाने वाला काम है और उसमें ग़लतियाँ हो जाती हैं।
- झुलसाR2 जीन1,476 में से 10 लाइनेंइनमें R2 का रोग झेलने वाला रूप मिला। यह जीन खेती वाले आलू में मेक्सिको के एक जंगली आलू, सोलेनम डेमिसम (Solanum demissum), से आया।
- झुलसाR8 जीन2 और 13 लाइनेंएक ही जीन के दो मार्करों ने 2 और 13 रोग झेलने वाली लाइनें पाईं। R8 भी सोलेनम डेमिसम से आया है।
- आलू का वायरस YRysto जीन25 से 35 लाइनेंतीन मार्कर; इनमें से दो ने लगभग वही लाइनें चुनीं, 95% से ज़्यादा एक जैसी, यानी जाँच भरोसेमंद है। Rysto जंगली प्रजाति सोलेनम स्टोलोनिफ़ेरम (Solanum stoloniferum) से आया।
- आलू का वायरस YRyadg जीन1 और 2 लाइनेंदो मार्करों को यह सिर्फ़ 1 और 2 लाइनों में मिला। Ryadg एंडीज़ के आलू, एंडिजेना, से आया; इस संग्रह में यह कम ही निकला।
- सिस्ट नेमाटोडदो नए मार्करफ़र्क़ नहीं कर पाएदोनों प्लेट पर ठीक चले, पर रोग झेलने वाले और न झेलने वाले आलू का जवाब एक जैसा आया, इसलिए अभी इनसे चुनाव नहीं हो सकता।
आलू का वायरस Y इसलिए अहम है कि यह माहू (एफ़िड) से फैलता है और बीज में पीढ़ी दर पीढ़ी बढ़ता जाता है, इसीलिए सालों में बीज कमज़ोर पड़ता है। जिस किस्म में Rysto या Ryadg हो, वह इसे झेल लेती है। इन जीनों से जिन रोगों को रोकना है, उनकी पूरी सूची के लिए पढ़ें: भारत में आलू की बीमारियाँ और उनका इलाज (अंग्रेज़ी)।
सिस्ट नेमाटोड के मार्कर क्यों नहीं चले, अभी तक
मार्कर उतना ही अच्छा है जितना वह जीन से जुड़ा है
मार्कर तभी काम करता है जब वह रोग झेलने वाले जीन के इतना पास बैठा हो कि दोनों हमेशा साथ-साथ अगली पीढ़ी में जाएँ। किसी ख़ास आलू संग्रह में यह जोड़ टूट जाए, तो मार्कर झेलने वाले और न झेलने वाले पौधों में एक जैसा पढ़ता है, और इस जाँच में सिस्ट नेमाटोड के दोनों मार्करों के साथ यही हुआ।
सिस्ट नेमाटोड झेलने की ताक़त को पकड़ना वैसे भी मुश्किल है। संस्थान के 2023 के नए काम में पूरे जीनोम के डीएनए से झुलसा झेलने का अंदाज़ा अच्छा लगा, पर सिस्ट नेमाटोड की दोनों क़िस्मों का अंदाज़ा कमज़ोर रहा। फ़िलहाल सिस्ट नेमाटोड की जाँच पुराने तरीक़े से ही होती है, नेमाटोड वाली मिट्टी में उगी जड़ों पर।
इसीलिए नीलगिरि के किसान अब भी उन्हीं किस्मों पर भरोसा करते हैं जो खेत में नेमाटोड झेलकर दिखा चुकी हैं, जैसे कुफ़री सह्याद्रि। पढ़ें: नीलगिरि में कुफ़री सह्याद्रि ने कुफ़री ज्योति और कुफ़री स्वर्णा को क्यों पीछे छोड़ा।
आगे क्या हुआ: पूरे जीनोम की जाँच और हाइब्रिड आलू
10 मार्करों वाली जाँच पहला, काम का क़दम थी। उसके बाद संस्थान पूरे आलू जीनोम में डीएनए पढ़ने की ओर बढ़ा है। 2023 में उसने 1,20,622 अच्छी क्वालिटी वाले डीएनए मार्करों से 222 आलू लाइनों की जाँच बताई। इसमें झुलसा झेलने के लिए 7 मार्कर जुड़ाव मिले, और सिस्ट नेमाटोड की दोनों क़िस्मों, ग्लोबोडेरा पैलिडा और ग्लोबोडेरा रोस्टोकिएन्सिस, के लिए 9 और 11।
इसी डेटा से जीनोमिक सिलेक्शन भी किया गया, जो किसी एक जीन के बजाय पौधे के सारे मार्करों को मिलाकर अंदाज़ा लगाता है कि पौधा रोग कितना झेलेगा। अंदाज़ा कितना सही बैठा, 0 से 1 के पैमाने पर, जहाँ 1 का मतलब पूरी तरह सही:
पट्टियाँ 0 से 1 के पैमाने पर बताई गई रेंज दिखाती हैं। झुलसा का अंदाज़ा अच्छा लगा; सिस्ट नेमाटोड का नहीं।
KASP मार्कर एक और काम में भी लगे हैं: हाइब्रिड आलू बनाने में। सच्चे बीज (TPS) से आलू उगाने के लिए ब्रीडर को ऐसी माँ-बाप लाइनें चाहिए जो जितनी हो सके एक जैसी (इनब्रेड) हों। 2023 में संस्थान ने 100 KASP मार्करों से नापा कि उसकी डिप्लॉयड माँ-बाप लाइनें कितनी एक जैसी हो गई हैं: शुरुआती लाइनें औसतन 56.7% एक जैसी थीं, और तीन बार अपने ही पराग से बीज बनवाने (सेल्फ़िंग) के बाद औसतन 80.7%। सच्चे आलू बीज से कहाँ तक जाया जा सकता है, यह भारत में ट्रू पोटैटो सीड की संभावना (अंग्रेज़ी) में पढ़ें।
किसानों और बीज कंपनियों के लिए इसका क्या मतलब है
- 1
रोग झेलने वाली किस्में जल्दी आ सकती हैं
ब्रीडर अब जानते हैं कि किन लाइनों में R2, R8, Rysto और Ryadg है, और उम्मीद के भरोसे नहीं, सोच-समझकर उनका क्रॉस करा सकते हैं। नई किस्मों को अब भी सालों खेत में परखा जाएगा, पर कमज़ोर पौधों पर वह समय बर्बाद कम होगा। सबसे नई किस्मों के बारे में पढ़ें: कुफ़री अभेद्य और कुफ़री रूबी अधिसूचित।
- 2
वायरस झेलने की ताक़त बीज को बचाती है
आलू का वायरस Y एक वजह है कि बीज बार-बार साफ़ जगह से बदलना पड़ता है। जिन किस्मों में Rysto या Ryadg हो, वे वायरस झेल लेती हैं, जिससे उनका बीज ज़्यादा दिन ठीक रहता है। जब तक ऐसी किस्में आप तक न पहुँचें, बीज भरोसेमंद जगह से ही लें; पढ़ें ब्रीडर और फ़ाउंडेशन बीज कैसे मिलता है (अंग्रेज़ी)।
- 3
बीज कंपनियाँ समझदारी से ब्रीडिंग कर सकती हैं
जो कंपनी अपने क्रॉस ख़ुद कराती है, वह माँ-बाप लाइनों और छोटे पौधों पर ऐसी ही डीएनए जाँच कर सकती है, और दो-तीन रोगों की ताक़त एक किस्म में जोड़ सकती है। बड़े संग्रह पर परखे गए मार्कर शुरुआत के लिए सबसे सुरक्षित हैं।
- 4
मार्कर रास्ता दिखाता है, गारंटी नहीं देता
सिस्ट नेमाटोड वाला नतीजा बताता है कि किसी मार्कर पर भरोसा करने से पहले उसे असली रोग के नतीजों से मिलाकर देखना ज़रूरी है। किस्म की रोग झेलने की ताक़त खेत में साबित होती है; मार्कर उसे जल्दी ढूँढ़ने में मदद करता है।
यही ब्रीडिंग कार्यक्रम अपनी लाइनों को खाने के गुणों के लिए भी जाँचता है; पढ़ें किस आलू में सबसे ज़्यादा विटामिन C। और अब तक आई हर कुफ़री किस्म के लिए कुफ़री किस्मों की पूरी गाइड देखें।
रोग झेलने वाली आलू किस्म चाहिए?
झुलसा या वायरस झेलने वाली किस्म का बीज, ब्रीडिंग या लाइसेंस के लिए संपर्क, या आपके इलाक़े के लिए कौन सी किस्म ठीक है इस पर सलाह: बताइए क्या चाहिए, हम अपने नेटवर्क से मदद करेंगे।
आगे पढ़ें
- नीलगिरि में आलू का सिस्ट नेमाटोड: कुफ़री सह्याद्रिindianpotato.in
- कुफ़री अभेद्य और कुफ़री रूबी: दो नई किस्में अधिसूचितindianpotato.in
- किस आलू में सबसे ज़्यादा विटामिन Cindianpotato.in
- Marker-Assisted Selection in Potato: How CPRI Screened 1,489 Potatoes With DNA Testsindianpotato.com · English
स्रोत: इंडियन पोटैटो इंटेलिजेंस
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